Laporan Praktikum Mikrobiologi "Pembuatan Medium Pda (Potato Dextrose Agar)"

a.   Judul Praktikum I

Pembuatan Medium PDA (Potato Dextrose Agar)

b.   Tujuan Praktikum

Adapun tujuan praktikum materi “Pembuatan Medium PDA (Potato Dextrose Agar) yaitu untuk mengetahui cara pembuatan media pertumbuhan mikrob.

c.    Bahan dan Alat

Adapun bahan yang digunakan saat praktikum yaitu :

Ø  Bahan yang dibutuhkan :

a.       Kentang: 20 gram

b.      Dextrose/gula: 25 gram

c.       Agar: 25 gram

d.      Aquades : 1200 gram

e.       Alkohol

f.       Tissue

g.      Kapas

h.      Alluminium foil

Ø  Alat yang digunakan

a.       Kompor

b.      Panci

c.       Pisau

d.      Gelas ukur

e.       Timbangan analitik

f.       Erlenmeyer

g.      Lampu bunsen

h.      Kaki tiga

i.        Tabung reaksi dan pengaduk

j.        Autoklaf

d.   Metode Kerja

1.      Mengupas kentang, menimbang 200 gram, mencuci dan memotongnya kecil-kecil

2.      Kentang direbus menggunakan aquades 600 ml sampai empuk

Perlu diperhatikan : air tidak perlu didihkan

3.      Mengambil air ekstrak kentang kemudian dicampur dengan aquades sampai larutan mencapai 1000 ml. kemudian dimasukkan kembali ke dalam panic dan dicampur dextrose dan agar. Panaskan bahan sampai mendidih sambil diaduk perlahan.

4.      Saat media masih panas dan semua bahan telah larut merata, menuang medium ke dalam 4 erlenmeyer 250 ml dan menuang lagi ke dalam tabung reaksi 5 ml sebanyak 15 botol kemudian disumbat dengan kapas dan dilapisi alluminium foil. Kemudian memasukkan dalam plastik dan diikat.

5.      Mensterilkan medium pada autoklaf pada suhu 121⁰ C dan tekanan 2 atm selama 15 menit.

6.      Setelah autoklaf di buka, memiringkan tabung reaksi yang ditujukan untuk membuat agar miring pada saat masih panas dan membiarkan membeku.

Penting diperhatikan :

1.      Memanaskan autoklaf selama 30 menit untuk mencapai suhu 121⁰ c

2.      Setelah bahan dipanaskan selama 15 menit, jangan langsung membuka aotoklaf. Dinginkan autoklaf selama 30 menit terlebih dahulu.

Metode pelaksanaan

1.      Pensterilan meja dengan menyemprotkan alkohol

2.      Meletakkan lampu bunsen pada tempat yang sudah di sterilkan dan menyalakannya

3.      Meletakkan cawan petri  dan erenmeyer di sebelah bunsen.

4.      Menuangkan cloropenicol pada Erlenmeyer lalu mengguncang larutan agar tercampur.

5.      Menuangkan PDA dalam cawan petri dalam keadaan hangat

6.      Setelah agar padat, cawan petri di rekatkan dengan selotip

7.      Meletakkan cawan petri di sebelah petri bunsen hingga PDA membeku.

e.       Hasil dan Pembahasan

1.      Hasil Pembuatan

Gambar 1. Medium PDA (Potato Dextrose Agar)

2.      Pembahasan

Berdasarkan hasil pengamatan dari dilaksanakannya pembibitan jamur kuping pada medium PDA (Potato Dextrose Agar) saat praktikum mikrobiologi, percobaan yang dilakukan gagal karena media dan bibit jamur terkontaminasi saat inokulasi. Penyebab terkontaminasi karena gas CO₂ dan bakteri yang berasal dari mulut saat berbicara dan banyak orang yang melaksanakannya.

f.       Kesimpulan

Berdasarkan tujuan praktikum dapat didimpulkan bahwa untuk mengetahui cara pembuatan media pertumbuhan mikrob yaitu dengan mensterilan meja dengan menyemprotkan alcohol, kemudian meletakkan lampu bunsen pada tempat yang sudah di sterilkan dan menyalakannya dan meletakkan cawan petri  dan erenmeyer di sebelah bunsen.Setelah itu, menuangkan cloropenicol pada Erlenmeyer lalu mengguncang larutan agar tercampur dan menuangkan PDA dalam cawan petri dalam keadaan hangat. Setelah agar padat, cawan petri di rekatkan dengan selotip serta meletakkan cawan petri di sebelah petri bunsen hingga PDA membeku.